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13 kDa蛋白质的转移条件是什么?

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最近,产生了分子量为13kDa的小分子蛋白质,每次都存在转移膜的问题(尾部为12%,样品由其他蛋白质制成)。
在运行胶水后,胶水使标记保持完美。当胶片完成后,您只能看到以前的聚合物MARKER。
小的10KDa MARKER分子消失,并且在深红色膜上没有看到低于15KDa的蛋白质条带。
测试凝胶中小于15kDa的蛋白质条带也是不可见的。
转移膜的状况在以下情况后被拒绝:1,350 mA 1小时。2,200mA / h。3,200毫安45分钟。4,75 mA 70分钟。5,350 mA,持续45分钟。先前的胶片转移条件是指其他大师制作小分子条件,这是基于这篇综述,参考文献,并且都失败了。
对于10K标记物也是如此,染色后蛋白质消失。
由于我担心春红的灵敏度不够,我也会用ECL扫描胶片,但最终没有条带。
请帮我思考一下,谢谢!
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点击次数:  更新时间2019-05-29  【打印此页】  【关闭
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